鲜姜汁对大肠杆菌及巨大芽孢杆菌的抑制作用研究

2022-03-11 08:42:34 | 浏览次数：

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1 材料与方法

1.1 材料与仪器

1.1.1 生物材料生姜：鲜品，购买于超市；供试菌种：大肠杆菌、巨大芽孢杆菌菌种均为商丘师范学院生命科学学院微生物学实验室提供。

1.1.2 仪器电磁炉、电子天平、高压蒸汽灭菌锅、电热恒温培养箱、超净工作台等。

1.2 试验方法

1.2.1 姜汁的制备将姜洗净，晾干，放在紫外灯下照射20 min消毒[12]后放入无菌的研钵，在无菌操作台上加入少许石英砂研磨，用4层纱布过滤得到鲜姜汁，定这时浓度为100%，用无菌水稀释（V/V）到75%、50%、25%，即得到4个浓度的姜汁。

1.2.2 培养基的制备称取牛肉膏5 g、蛋白胨10 g、氯化钠5 g、琼脂20 g，量取1 000 mL蒸馏水，混合加热至完全溶解，调节pH至7.0～7.4后分装于250 mL三角瓶中，同时制试管斜面，灭菌[13]。

1.2.3 菌种的活化将大肠杆菌和巨大芽孢杆菌按照无菌操作规程分别接入试管斜面， 37 ℃恒温培养箱中培养24 h。

1.2.4 菌悬液的制备用接种环挑取一定量的活化后的大肠杆菌和巨大芽孢杆菌菌苔，放入装有10 mL无菌水的试管中，振荡5 min，使菌体充分散开，制成2种菌的菌悬液。

1.2.5 抑菌试验采用滤纸片法[14]，取直径6 mm的灭菌滤纸片放入各浓度的姜汁中浸泡30 min，对照滤纸片用无菌水浸泡。将待试菌悬液各1 mL加于平板培养基后用无菌涂布棒涂布均匀制成含菌平板，平板静置30 min后用无菌镊子把滤纸片贴在含菌平板上，每个平板放4片同种滤纸片，每个浓度4个重复，每组1个对照。平板于37 ℃恒温培养箱中倒置培养48 h，取出测定并记录抑菌圈直径，比较不同浓度姜汁的抑菌效果。

2 结果与分析

抑菌圈测量结果见表1、表2。由表1、表2可见，姜汁浓度越大，抑菌效果越强，抑菌圈直径越大。空白对照均未出现抑菌圈，说明滤纸片对两种受试菌均无抑菌活性。

3 小结与讨论

实验以大肠杆菌和巨大芽孢杆菌作为受试菌种，研究鲜姜汁的抑菌活性，证明姜汁对2种细菌具有明显的抑菌作用，与郑俏然等[15]用乙醇提取法进行的试验结果相比较，抑菌圈直径明显较小，可能是由于多种因素影响导致结果的不同。生姜中挥发油的化学提取工艺有索氏法、超临界CO2流体萃取法、水蒸气蒸馏法、共水回流冷凝法等[16]。本试验采用的是鲜姜直接研磨提取，并且未进行浓缩处理，结果的差异可能是由于提取工艺的差别造成的。鲜姜汁对巨大芽孢杆菌的抑菌研究尚未有相关的报道，本试验证明鲜姜汁对巨大芽孢杆菌有抑菌作用。

参考文献：

[1] 林启寿.中药成分化学[M].北京：科学出版社，1977.

[2] 徐国民.薏米姜茶的加工技术[J].食品工业，1994（5）：41-42.

[3] 李兆龙.国外对生姜的药用研究[J].中国药学杂志，1990，25（4）：15-17.

[4] 林茂，阚建全.生姜中天然抗氧化剂的应用[J].中国食品添加剂开发应用，2007（1）：151-154.

[5] 刘萼华.生姜对几种食用植物油抗氧化效果实验研究[J].粮食储藏，2005，34（5）：41-43.

[6] 关洪全，栗田启幸，大荒田素子，等.生姜食盐醋酸对食品污染菌的协同抗菌作用的研究[J].中医药学刊，2003，21（1）：119-120.

[7] 关洪全，李海波.生姜对常见污染食品真菌抗菌活性的探讨[J].辽宁中医学院学报，2000，2（3）：116-117.

[8] 游剑，范玫玫，王跃生.生姜降血脂作用研究进展[J].江西中医药，2007，38（2）：57-59.

[9] 倪淑华，李秀花，刘雪枫，等.生姜对大鼠血脂代谢影响的研究[J]. 中国老年学杂志，2006，26（1）：89-99.

[10] 付爱华，尹建元，孙莹，等.黄精和生姜抗皮肤癣菌活性研究[J]. 白求恩医科大学学报，2001，27（4）：384-385.

[11] 陈碰玉，林蒙，陈艳，等.新鲜生姜对幽门螺杆菌抑菌杀菌作用的实验研究[J].中医药通报，2002，1（1）：49-50.