上海市健康体检者中首次检出１株喀普斯塔德沙门菌

沙门菌（Salmonella）属是一类广泛分布于自然界，能引起各种脊椎动物的肠道感染，对人类和动物具有极大危害的革兰阴性肠道致病菌。在世界各地的食物中毒中，由沙门菌引起的食物中毒占首位或第二位，所以我国的《中华人民共和国食品卫生法》和《公共场所卫生管理条例》把沙门菌列为食品从业人员和公共场所从业人员体检中的必检项目。沙门菌属是一个很大的属，其血清型有2000多个，带菌者以鼠伤寒沙门菌、德尔卑沙门菌、鸭沙门菌、火鸡沙门菌和纽波特沙门菌等菌型为最常见^[１]。近年来陆续有一些新菌型报道，如斯坦利、查理、科尔特里克沙门菌等，但我区始终未发现过沙门菌新菌型。2005年3月，我们在1件健康体检者的肛拭标本中，首次分离出1株喀普斯塔德沙门菌。现将该菌的形态、培养特性、生化鉴定、噬菌体裂解试验、血清凝集试验及药敏试验结果报告如下。

1材料与方法

1.1材料

1.1.1标本来源标本来源于1名酒店服务生，由我区疾病预防控制中心体检科在食品从业人员健康体检

时，用无菌棉拭采肛拭，置卡里—布莱尔运送培养基内，于当日送我所微生物检验科做沙门菌、志贺菌检测。

1.1.2培养基亚硒酸盐增菌液、SS琼脂、各生化反应管等培养基均购自于上海市疾病预防控制中心，按其标签上的方法于保质期内新鲜配置而成。

1.1.3诊断血清和噬菌体56种沙门菌属诊断血清由卫生部成都生物制品研究所研制提供；肠杆菌科诊断用噬菌体，由广州虎克生物制品有限公司生产供应，均在有效期内使用。

1.1.4药敏试验药敏试验按NCCLS—2004抗菌药物纸片琼脂扩散法进行。所用MH增菌液、MH琼脂和药敏纸片由上海市疾病预防控制中心提供，结果按K—B药敏试验判断标准（NCCLS，2004，USA）判断。

1.2方法

将肛拭直接划线接种SS琼脂平板，37℃培养24h；同时于亚硒酸盐增菌液中37℃增菌培养18h，再挑取该亚硒酸盐增菌液一环划线接种SS琼脂平板，37℃培养24h。挑取可疑菌落进一步生化鉴定和血清学鉴定。

2结果

在直接划线接种的SS琼脂平板上，几乎无可疑菌落。而在经亚硒酸盐增菌液增菌后接种的SS琼脂平板上可见中等大小、圆整、无色半透明、表面光滑湿润、中心带黑色的可疑菌落，挑取半个该菌落接种双糖管，37℃培养24h，同时以另半个菌落作革兰染色镜检。双糖管反应结果为葡萄糖产酸产气，甘露醇阳性，蔗糖阴性，H2S阳性，吲哚阴性，动力阳性。

2.1形态与染色

细菌涂片革兰染色为革兰阴性无芽孢杆菌。

2.2肠杆菌科诊断噬菌体裂解试验

此菌仅被O—Ⅰ噬菌体裂解，不被C、Sh、E、CE、E-4、Ent噬菌体裂解，具有沙门菌属的特性。

2.3生化特性（见表1）

2.4血清凝集试验

将该菌与沙门菌A-F“O”多价血清作凝集试验，反应呈阳性；与O4血清凝集也呈阳性反应，与生理盐水对照不凝集。与H多价2、H多价4、H_e,h、H_h及H₇因子血清均发生凝集，与H多价2中的H_n、H_x、H_f、H_g 、H_m、H_s、H_p、H_t和H多价4中的H₂、H₅、H₆、H_z6因子血清均不发生凝集，该菌抗原式为：4∶e,h，7。

根据以上培养特性、涂片染色、生化反应、肠杆菌科噬菌体裂解试验和血清学凝集试验结果，判断该菌为喀普斯塔德沙门菌。送市疾病预防控制中心细菌实验室复核无误。

2.5药敏试验

该菌对头孢噻肟、奥格门丁、头孢噻吩、丁胺卡那霉素、氨曲南、头孢呋新敏感，对四环素、利福平、氧氟沙星、奈替米星、二甲胺四环素、萘啶酸、复方新诺明、环丙沙星、氨苄青霉素、庆大霉素耐药。

3讨论

机体感染沙门菌的后果与机体抵抗力及吞食细菌的数量、血清型、侵袭力等有关。

吞入大量活菌可引起显性感染，菌量减少10～100倍时常呈暂时的带菌状态，所以对于无腹泻或轻微腹泻的健康带菌者，一般带菌量较少，在标本直接划线接种的SS琼脂平板上很难找到可疑菌，即使有也可能被正常杂菌所掩盖，而经过亚硒酸盐增菌后才能找到较典型的可疑菌落，由此提示健康人群体检时沙门菌检测一定要用亚硒酸盐增菌液放大其菌量，否则带菌者的病原菌可能会隐藏在众多正常菌下，造成漏检。同时，以沙门菌属肠杆菌科噬菌体裂解的特有模式可有助于正确筛选沙门菌。

目前全世界已分离出2000多个沙门菌血清型，我国已发现216个^[2]，随着气候、生活习惯等的改变，尤其是随着检验技术的提高，会发现越来越多新的沙门菌血清型，这就要求我们除了会采用传统的培养方法^[3]外，还需要多学习研究新的检验技术，如以抗体为基础的检测方法^[4]和以核酸为基础的快速检测方法^[5]等，以提高沙门菌的检出率，从而把好食品服务行业健康人群带菌的筛查关，为大众提供健康安全的生活环境。

虽然蛋、家禽和肉类产品是沙门菌病的主要传播媒介，但带菌者因素在沙门菌引起的食物中毒中的作用不容忽视，因为它是造成肉类食品死后污染的重要原因。所以应加强食品卫生法规的宣传力度，对食品服务行业人员中体检不合格者应予重视，必须在治疗后才能予以上岗，不能将体检之事留于形式，只为应付执法者的检查。

4参考文献

［1］何晓青.卫生防疫细菌检验［M］.南昌：新华出版社，1989.480.

［2］王秀茹.预防医学微生物学及检验技术［M］.北京：人民卫生出版社，2002.309～318.

［3］GB 17012—1997, 感染性腹泻的诊断标准及处理原则［S］.

［4］黎兆滚，陈博文，冯维占，等.用ELISA法快速检测沙门菌［J］.中国人兽共患病杂志，1998，14（1）：61～62.

［5］刘华伟，郭蔼光，马立农，等.PCR技术在沙门氏菌快速检测中的应用［J］.动物医学进展，2004，25（6）：55～58.

(收稿日期：2006-05-29)