狼毒不同溶剂提取物杀烟蚜活性初步测定

材料和方法

1.1 材料

狼毒（狼毒地上部分，2014年10月采自云南省迪庆藏族自治州香格里拉县），经西南林业大学林学院植物学教研室杜凡教授鉴定为大戟科大戟属植物狼毒；石油醚（分析纯，天津市风船化学试剂科技有限公司）；氯仿（分析纯，云南杨林工业开发区汕滇药业有限公司）；乙酸乙酯（分析纯，广东省化学试剂工程技术研究开发中心）；烟苗（西南林业大学温室大棚培养）；供试蚜虫采自西南林业大學林学院温室大棚养殖的烟苗上。

1.2 试验方法

将阴干的2.5 kg狼毒地上部分材料粉碎，用95%的乙醇冷浸3次，用旋转蒸发仪将提取液浓缩成浸膏。将浸膏用水悬浮，依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯分别萃取3次，将萃取液用旋转蒸发仪进行浓缩合并，最后得到总浸膏348 g。萃取后得到石油醚提取物浸膏6 g，得到氯仿提取物浸膏15 g，得到乙酸乙酯提取物浸膏54 g，水提取物浸膏273 g。查阅国家对于农药使用的相关标准要求，将4种提取物浸膏分别配制成6个不同浓度梯度，分别为0.125、0.250、0.500、1.000、1.500和2.000 mg/mL。

采用叶片浸渍法[23，24]：选取生长良好的新鲜烟叶片，在药液中浸渍5 s后取出，放在培养皿内，吸去多余的药液，并将湿润的棉条包裹在叶柄处，以保持叶片湿度；挑取30头大小一致、行动活泼的蚜虫，将蚜虫转移到叶片上，放在温度25 ℃、相对湿度85%左右的培养箱中培养，分别于12、24、36和48 h观察试虫的反应症状，记录死亡虫口数（死亡标准为试虫不能正常活动或者轻轻触动虫体无任何反应）。每个处理重复3次，计算死亡率，数据取3次重复的平均值。死亡率计算公式如下：死亡率=死亡数/供试总数×100%。

2 結果与分析

狼毒的石油醚、氯仿、乙酸乙酯、水提取物的杀蚜虫活性试验数据见下表1、表2、表3、表4。

由表1可知，随着时间的增加，蚜虫死亡率升高，浓度为0.500 mg/mL，12 h观察时，蚜虫已经全部死亡。

由表2可知，随着时间的增加，蚜虫的死亡率升高，但是随着浓度的增加，死亡率的变化先降低后升高。

由表3可知，随着时间的增加，蚜虫的死亡率升高，随着浓度的增加，规律不是很明显，但是基本呈现升高趋势。

由表4可知，随着时间的增加，蚜虫的死亡率升高，但是随着浓度的变化，蚜虫死亡率变化没有规律。

从表1可以看出，随着时间以及浓度的增加，蚜虫死亡率升高，在浓度为0.500 mg/mL，时间为12 h时，蚜虫已经全部死亡，表明石油醚提取物杀烟蚜作用最强。从表2、表3、表4可以看出，随着时间的增加，蚜虫的死亡率升高，但是随着浓度的增加，死亡率的变化没有规律性。

3 小结与讨论

本试验用乙醇提取狼毒浸膏，将浸膏用水悬浮，用石油醚、氯仿、乙酸乙酯萃取，将萃取后的液体部分蒸干，得到四部分粗提物。将四部分粗提物分别配成6组不同的浓度，做杀蚜虫试验，观察蚜虫死亡情况，进行记录。从试验结果可以看出，石油醚提取物杀虫活性最强，在浓度为0.500 mg/mL，时间为12 h时，蚜虫已经全部死亡。

烟蚜通过取食烟苗汁液生存，在取食的过程中会传播疾病，也会导致烟苗营养物质流失、畸形生长甚至死亡，影响产量和质量。狼毒植物化学成分、药理活性及杀虫活性复杂多样。刘素琪等[25]用狼毒大戟的提取物对朱砂叶螨进行杀虫活性试验，发现石油醚部分杀虫活性最强，赵奎君等[26]用狼毒大戟的提取物对结核杆菌抑菌试验发现石油醚部分抑菌作用最强，本试验也是石油醚部分杀烟蚜活性最强。因此，希望后续研究者通过对狼毒石油醚部分进行化合物的提取分离、结构鉴定、构效关系研究，期望从狼毒的石油醚部分分离得到高效低毒的植物源无公害杀虫剂，再将其应用到农业中，为广大的烟农造福。

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