甘草及甘草提取物对小鼠免疫保护作用的研究

材料与方法

1.1受试物 甘草购自张仲景大药房;甘草提取物以甘草饮片加10倍水煎煮提取3次，每次2h，过滤、干燥得粉末，1克提取物相当于6.1g甘草饮片。

1.2动物 健康KM种小鼠，单一性别，体重18～22g，由新乡医学院实验动物中心提供。

1.3仪器 电子天平、分析天平、酶标仪、96孔细胞培养板、离心机、游标卡尺等

1.4实验分组 100只KM小鼠随机分成两个组，一组进行迟发型变态反应、血清溶血素实验，另外一组进行小鼠脾淋巴细胞转化实验、NK细胞活性实验。每组分别设对照组、甘草低、高剂量组、甘草提取物低、高剂量组。

2 方法

甘草低、高剂量组分别以甘草100、300mg/kg∙BW，甘草提取物低、高剂量组分别以甘草提取物20mg、50mg/kg∙BW进行小鼠灌胃，对照组以去离子水替代，连续灌胃30天。处死小鼠进行足趾肿胀度、半数溶血值（HC50）、COA诱导脾淋巴细胞增殖、溶血空斑数和NK细胞活性检测。方法按照中国卫生部《保健食品检验与评价技术规范》2003版中规定操作。

数据处理 采用检验的统计方法进行数据处理。

3结果

3.1对小鼠细胞免疫的影响

灌胃小鼠受试物30天后，甘草及甘草提取物各剂量组小鼠的足跖肿胀度与对照组比较，均显著升高，具有統计学差异（P<0.05）;甘草提取物高剂量组小鼠的淋巴细胞增值数与对照组比较，显著升高，有统计学差异（P<0.05），其他实验组小鼠均无显著差异（P>0.05）。结果见表1

3.2对小鼠半数溶血值（HC50）、溶血空斑数和NK细胞活性的影响

灌胃小鼠受试物30天后，与对照组比较，甘草提取物高剂量组小鼠血清半数溶血值（HC50）显著升高，差异有统计学意义（P<0.05），剩余其他实验组小鼠血清半数溶血值（HC50）、溶血空斑数与对照组比较，差异均无显著性（P>0.05）。甘草及甘草提取物各剂量组小鼠的NK细胞活性与对照组比较，均显著升高，具有统计学差异（P<0.05）。结果见表2

4讨论

本实验结果显示，甘草及甘草提取物各剂量组小鼠的足跖肿胀度、NK细胞活性与对照组比较，均显著升高，具有统计学差异（P<0.05）;甘草提取物高剂量组小鼠的淋巴细胞增值数、血清半数溶血值（HC50）与对照组比较，显著升高，有统计学差异（P<0.05），其他实验组小鼠均无显著差异（P>0.05）。表明甘草及甘草提取物均能一定程度增强小鼠免疫力。甘草提取物为甘草经过水提取、干燥而得粉末，本实验甘草和甘草提取物实验剂量折合药材饮片相当，实验结果甘草提取物高剂量组对小鼠淋巴细胞增值数、血清半数溶血值（HC50）有明显影响，而对应剂量甘草饮片高剂量组缺没有影响。一定程度上说明，甘草经过提取并无降低其药效作用。

引用文献

1.《中华人民共和国药典》2015版一部，P86

2.方鉴.甘草及其有效成分对免疫系统调节作用探究[B].海峡药学，2017年，29（ 8）： 28-30.