NS398对卵巢癌细胞系CAOV3免疫杀伤作用的体外研究

【摘要】目的观察和探讨COX2选择性抑制剂NS398对卵巢癌细胞系CAOV3增殖抑制作用及对CTL细胞体外免疫杀伤作用的影响。方法放射免疫法测定CAOV3细胞及经NS398处理的CAOV3细胞培养上清液中的PGE2含量，流式细胞仪分析CTL细胞表型，MTT比色法检测CTL细胞杀伤活性。结果NS398能抑制CAOV3细胞分泌PGE2；经NS398处理的CAOV3刺激诱导产生CTL细胞对CAOV3细胞的杀伤活性显著增加。结论NS398可能成为卵巢癌预防与治疗的新靶点。

【关键词】NS398；CTL；卵巢癌

卵巢癌起病隐匿，五年生存率在30%左右[1]。NS398是一种磺胺类药剂的衍生物，是COX2选择性抑制剂[2]。特异性细胞毒性T细胞（CTL）杀伤肿瘤作用是抗原特异性的[3]，本研究旨在探讨NS398对卵巢癌细胞系CAOV3增殖抑制及对CTL细胞体外免疫杀伤作用的影响，为卵巢癌的预防和治疗提供新的理论依据。

1材料和方法

11材料卵巢浆液性癌细胞系CA0V3由中国医科大学细胞生物实验室提供。NS398为美国Cayman公司产品。PGE2放免测定试剂盒由苏州医学院血液研究所提供。

12放射免疫法测定CAOV3细胞及经NS398处理的CAOV3细胞培养上清液中的PGE2含量。

13卵巢癌CAOV3细胞体外刺激外周血单个核细胞（PBMC）诱导特异性细胞毒性T细胞（CTL）；流式细胞仪分析CTL细胞表型。

14CTL杀伤活性检测：采用MTT比色法检测CTL细胞杀伤活性。

15统计学方法应用SPSS 100统计软件分析数据。样本均数以x±s表示，样本均数比较采用t检验，多组比较采用方差分析。

2结果

21PGE2放射免疫结果显示，经NS398处理后，CAOV3细胞培养液中PGE2含量减低，差异有统计学意义（P<005）。

22在IL2存在的条件下，PBMC经NS398处理的CAOV3细胞两次抗原刺激成功诱导产生CTL，表达CD3+CD8+阳性率分别为41%、64%，而未经处理的PBMC CD3+CD8+阳性率仅为25%。

23MTT比色法检测CTL杀伤活性结果显示，CTL细胞对CAOV3细胞具有明显的杀伤活性，实验组CTL细胞对CAOV3的杀伤率显著高于对照组（P<005）。

3讨论

环氧合酶是前列腺素合成过程中的重要限速酶，COX2及其代谢产物与包括卵巢癌在内机体多种恶性肿瘤发生发展密切相关。机体存在多种免疫监视机制，发挥着重要的抗肿瘤作用，细胞免疫是抗肿瘤的主力，特异性细胞毒性T细胞（CTL）能特异性杀伤肿瘤细胞。但肿瘤在人体免疫监视下仍能发生、发展并且发生转移，原因可能在于肿瘤具有免疫抑制和/或免疫逃逸能力。

本研究表明COX2选择性抑制剂NS398作用于卵巢癌细胞，能明显抑制肿瘤细胞增殖，呈剂量和时闻依赖关系。并且能明显抑制肿瘤细胞分泌PGE2。另外，经NS398处理的CAOV3细胞刺激诱导产生CTL对CAOV3细胞的杀伤活性显著增加。提示卵巢癌细胞分泌PGE2增加对免疫的影响可能与其影响APC提呈抗原有关。本实验研究从一个新的角度探讨NS398对免疫的调节作用。Stolina M等[6]研究的COX2选择性抑制剂可减少前列腺素生成，部分逆转肿瘤免疫抑制作用的结论亦与本研究相一致。本研究为NS398用于卵巢癌的预防及治疗开辟了光明前景。

参考文献

[1]连立娟林巧稚妇科肿瘤学第2版北京：人民卫生出版社，1996：449.

[2]Futaki N NS398， a novel nonsteroidal antiinflammatory drugwithpotent analgesic and antipyretic effects， which causes minimal stoach lesions Gen Pharmacy，1993 24：1051 103.

[3]陈慰峰医学免疫学第3版人民卫生出版社，2000：230.