儿童A型流感病毒与呼吸道合胞病毒性肺炎血清细胞间黏附分子

儿童A型流感病毒与呼吸道合胞病毒性肺炎血清细胞间黏附分子—1的表达及意义

2022-04-13 08:42:28 | 浏览次数：

【摘要】目的：探讨儿童A型流感病毒肺炎与呼吸道合胞病毒性肺炎中血清可溶性细胞间黏附分子-1的表达及其意义，以指导临床治疗和预防。方法：选取于本科住院的肺炎儿童，根据逆转录聚合酶链反应结果分为FA组（A型流感病毒阳性）36例，RSV组（呼吸道合胞病毒阳性）22例，同时选取同期来本院体检的健康儿童41例为对照组，分析比较三组儿童的血清sICAM-1值。结果：FA组和RSV组血清sICAM-1值均高于对照组，比较差异有统计学意义（P<0.05）。结论：A型流感病毒肺炎与呼吸道合胞病毒性肺炎儿童中sICAM-1表达水平升高，是导致儿童气道炎症的重要炎症因子之一，可为临床治疗采用抗粘附疗法及抗炎抑制炎性因子提供佐证。

【关键词】儿童； A型流感病毒；呼吸道合胞病毒；肺炎；血清可溶性细胞间黏附分子-1

【Abstract】 Objective： The expression and significance of serum soluble intercellular adhesion molecule-1 in children with influenza A virus pneumonia and respiratory syncytial virus pneumonia in -1， in order to guide the clinical treatment and prevention. Method： In our hospital from pneumonia in children， according to the reverse transcriptase polymerase chain reaction results were divided into FA group （A influenza virus positive） 36 cases， group RSV （respiratory syncytial virus positive） in 22 cases， at the same time in healthy children at our hospital physical examination 41 cases as control group， serum sICAM-1 were compared between the three groups children’s value. Result： In FA group and RSV group， serum sICAM-1 values were higher than those in the control group， there was significant difference （P<0.05）. Conclusion： The expression of A increased the level of sICAM-1 influenza virus pneumonia and respiratory syncytial virus pneumonia in children， which is one of the important inflammatory airway inflammation in children， can provide clinical treatment with anti adhesion therapy and anti-inflammatory， inhibiting inflammatory factors to provide evidence.

【Key words】 Children； Influenza A virus； Respiratory syncytial virus； Pneumonia； Serum soluble intercellular adhesion molecule-1

First-author’s address： Guangzhou Women and Children Center， Guangzhou 510120， China

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2015.01.003

肺炎是儿科常见肺部疾病，严重威胁小儿的健康及生命，据统计，在世界范围内肺炎是5岁以下儿童主要死亡原因，在我国儿童死亡原因中占首位[1]。随着病原学变迁以及疾病谱的改变，病毒所致的小儿肺炎有逐年增高趋势[2]。为探讨儿童A型流感病毒（FA）肺炎与呼吸道合胞病毒性（RSV）肺炎时血清可溶性细胞间黏附分子-1（solube intercellular adhesion moleculet， sICAM-1）表达水平的差异，应用酶联免疫吸附试验法对2013年1-4月在本科住院的FA肺炎和RSV肺炎儿童进行血清sICAM-1水平检测，结果如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料选取2013年1-4月在本科住院的符合肺炎诊断标准[3]的儿童，用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）方法进行检测呼吸道病原学9项（包括A型流感病毒、B性流感病毒、合胞病毒、腺病毒、肺炎支原体、肺炎衣原体、人偏肺病毒、人博卡病毒及肠道病毒），筛选出A型流感病毒阳性病例36例（FA组），男27例，女9例，年龄3～60个月，平均（31.4±22.7）月；呼吸道合胞病毒阳性病例22例（RSV组），男14例，女8例，年龄1～38个月，平均（8.5±2.1）月，两观察组均排除两种或以上病原混合感染患儿；另设正常儿童对照组41例，系同期来本院体检的健康儿童，其中男24例，女17例，年龄3～50个月，平均（12.1±1.9）月，无心、肺、肝、肾脏等基础疾病，3周内无传染性病史及变态反应等病史。FA组、RSV组分别与对照组年龄比较，差异有统计学意义（P<0.05），见图1。FA组、RSV组分别与对照组性别构成比较，差异无统计学意义（P>0.05），图2。

图1 三组儿童年龄比较图

注：group1：RSV组；group2：对照组；group3：流感组

图2 三组儿童性别构成比较

注：group1：RSV组；group2：对照组；group3：流感组

1.2 方法（1）标本采集：采集住院当天的咽拭子标本，放入含双抗和二性霉素的1640取材液中，冰上运送至实验室。（2）核酸提取：各检测项目病毒核酸采用扩增荧光定量检测试剂盒的配套抽提试剂提取。（3）病毒核酸检测：FA、RSV采用广州华银医药科技有限公司的病毒核酸检测试剂盒，采用PCR-荧光探针法，操作按试剂盒说明进行。（4）血清可溶性细胞间粘附分子-1（sICAM-1）测定：各组入选儿童空腹抽取静脉血3 mL，分离血清，-40 ℃备用待检。所有标本的血清sICAM-1采用酶联免疫吸附试验法，试剂盒由深圳欣博盛生物科技有限公司提供，按试剂盒说明书要求操作，结果用ELx800酶标仪读取。

1.3 统计学处理使用SPSS 20.0统计学软件分析数据，应用t检验和线性回归方法，P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

酶联免疫吸附试验法检测三组儿童的血清sICAM-1水平，FA组儿童血清sICAM-1水平为（1312.8±756.2）μg/mL，RSV组为（991.7±183.4）μg/mL，对照组为（852.3±170.8）μg/mL。RSV组、FA组分别与对照组血清sICAM-1水平比较，差异有统计学意义（P<0.05）。在调整了的年龄和性别影响因素采用线性回归比较方法RSV组、FA组分别与对照组血清sICAM-1水平比较仍有统计学意义（P<0.05）。见表1。

表1 调整了年龄和性别的差异后三组儿童的血清sICAM-1比较

组别β95% Wald置信区间P值

下限上限

RSV组（n=22）121.70826.599216.816.012

对照组（n=41）0000

FA组（n=36）471.358221.723720.993.000

3 讨论

近二、三十年来，由于诊断技术的进步，特别是聚合酶链反应（PCR）的应用，肺炎病原检出率尤其是病毒感染逐渐增加[4]。肺炎时，感染性因素经气道入肺，刺激肺泡，产生多种炎症细胞因子，他们再刺激肺内多炎症细胞因子介导外周循环的炎症细胞迁徙到肺间质和肺泡，进一步释放大量炎症介质和细胞因子造成炎症反应的进一步加重[5-7]。细胞粘黏分子是一大类膜蛋白，在免疫调节、炎症反应、病毒感染等生理和病理生理过程中发挥重要作用。细胞间黏附分子-1（ICAM-1）是近年来发现的一种重要生物活性物质，对局部炎症的发生和形成具有重要作用[8]。气道上皮细胞既是炎症的靶细胞，又扮演着效应细胞的角色，可分泌和表达多种细胞因子及黏附分子，从而参与炎症反应的全过程。在静息状态下，白细胞和内皮细胞黏附的黏附分子表达量低，在炎症介质的作用下，白细胞和内皮细胞的黏附分子表达增多。有体外实验研究显示RSV感染可显著上调气道上皮ICAM-1表达，RSV毛细支气管炎患儿也存在黏附分子表达增多[9]。流感病毒感染人脐静脉内皮细胞后，在炎症因子作用2 h时，内皮细胞表面的ICAM-l增加约30倍，ICAM-l的增高在12～24 h达到高峰，可持续72 h[10]。sICAM-1是ICAM-l的另一种形式，表达于血管内皮细胞，可调节白细胞和血管内皮细胞的黏附，促进白细胞向组织内迁移，白细胞激活后释放各种酶和自由基，可引起组织的损失[11]。它在哮喘中的作用机制已引起相当重视，而ICAM-l与其他肺部炎症性疾病的关系研究甚少，国内外已有多项研究证实鼻病毒后，ICAM-1由于其双重作用而成为注视的焦点：（1）作为上皮细胞之间、或上皮细胞结合渗出的白细胞如嗜酸细胞和淋巴细胞亚群的黏附分子[12]；（2）主要的RV的受体。体外和体内研究证实RV感染上调ICAM-1表达。近年来随着黏附机制对肺损伤与修复机制的阐明，越来越多的证据表明黏附分子参与并介导细胞以及细胞与基质间的相互作用，在决定肺内炎症和纤维化过程中起着重要作用。ICAM-1在呼吸系统中参与许多炎症性疾病，其中黏附功能是参与许多炎症性疾病的重要病理生理基础。中性粒细胞与内皮细胞结合，而后渗出至炎症部位是一个多重性的过程，这过程需要不同种细胞黏附分子（如ICAM-1、选择素、整合素）的上调参与。由于黏附分子在炎症形成过程中起着决定性作用，尤其是在肺组织中的表达，乃至ARDS的发病以及治疗中均有其非常重要的实验意义以及临床价值。因而有选择性地抑制及调节CAMs功能，可望抑制炎性细胞浸润及炎性反应[13]。

肺部病毒性感染时，感染上皮细胞通过高表达ICAM-1促进其与中性粒细胞黏附，从而导致气道损伤。研究发现感染呼吸道合胞病毒72 h后，上皮细胞表达ICAM-1明显上升，IFN-γ、IL-1、TNF-α均能增进其表达，最早可于感染后24 h达顶峰，从而提高中性粒细胞和嗜酸性粒细胞黏附至呼吸道上皮细胞，进而引起各种炎症细胞游走入气道产生损伤，病毒感染后1～2 d支气管上皮细胞ICAM-1表达量成倍增长，抗ICAM-1单克隆抗体可抑制中性粒细胞与上皮细胞黏附。实验中鼠肺组织中ICAM-1及其受体表达含量在攻毒后1 d即开始升高，第4天达高峰[14]。在以往对呼吸道合胞病毒和腺病毒肺炎的研究中，炎症细胞黏附是其肺部感染的重要环节，而ICAM-1与其结合是炎症细胞黏附聚集的关键。ICAM-1正常呈低水平表达，受到炎症因子刺激数小时后迅速表达，表达上调的ICAM-1与其白细胞表面受体相互作用介导了炎症反应中白细胞跨内皮迁徙及想炎症部位的积聚过程[15]。

A型流感病毒和呼吸道合胞病毒是导致婴幼儿毛细支气管炎和肺炎住院的主要的病原体之一。本研究结果显示住院呼吸道合胞病毒性肺炎的平均年龄在8个月左右，A型流感病毒性肺炎的平均年龄在12个月左右，提示这两种病原的肺炎住院儿童以婴幼儿为主，尤其是12个月以下婴儿，但男女无性别上的差异。FA组、儿童血清sICAM-1水平为（1312.8±756.2）μg/mL，RSV组儿童血清sICAM-1水平为（991.7±183.4）μg/mL，与正常对照组sICAM-1水平（852.3±170.8）μg/mL比较，差异有统计学意义，提示FA和RSV感染后气道上皮和血管内皮受损，促发了炎性因子的释放，sICAM-1就是其中之一，因此，在治疗上宜选用抗黏附抗炎抑制炎性因子的药物，以减轻或缓解病程。

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