类风湿关节炎关节破坏中免疫炎症细胞与细胞因子的作用机制研究

摘要 目的：对RA患者免疫炎症细胞及细胞因子间的作用机制进行分析和研究。方法：对临床上50例RA患者血液样本与25例对照组的血液样本进行对比。结果：RA患者中的骨桥蛋白（OPN）的表达水平显著高于对照组，表达指数水平高达8.2，是对照组的8倍。对RA患者的关节液进行检测发现IL—12、IL—18、IL—10等细胞因子的水平显著高于对照组。结论：在RA患者中的发病机制是OPN以细胞因子或调控因子的方式参与到RA的发病过程中，对OPN细胞及其受体因子的研究可为RA患者新药的开发及治疗提供新的途径。

关键词 类风湿关节炎细胞因子作用机制

doi：10.3969/j.issn.1007—614x.2012.28.007

类风湿关节炎（RA）是一种自身免疫反应的疾病，目前临床对RA患者并没有特效的疗法，主要以激素治疗和对症治疗为主，而对于RA患者发病机制的研究一直是国际上研究的热点[1]。2010年1月～2012年1月收治RA患者50例，对其免疫细胞及细胞细胞因子的作用机制进行分析与研究，现报告如下。

资料与方法

选取50例确诊为RA的患者作为研究对象，年龄38～55岁，其中男35例，女15例，病程3～8年，患者诊断按美国风湿疾病委员会制定的标准。选取25例非RA患者作为对照组，对照组男15例，女10例，年龄35～58岁。两组在临床资料上不存在差异性（P>0.05）。

方法：OPN水平的检测：采用已包被了抗体的孔板，孔板洗净后，在孔板上滴加OPN标准样品，并将样品置于37℃的恒温箱中1小时，恒温结束后将样品洗涤7次，完毕后在每孔中加入0.1ml的标记抗体，并置于4℃冰箱中进行恒温半小时。时间到点后，于每孔中加入0.1ml的显色液，并于每孔中加入0.1ml的终止液，并于波长450nm的酶示仪上进行读数[2]。

细胞因子的检测：IL—12、IL—18、IL—10采用ELISA酶联免疫反应检测。

结果

RA患者中的OPN值显著高于对照组的患者，ELISA酶联结果显示，RA患者中的OPN水平远远高于对照组（P<0.05），见图1。

图1 RA患者OPN值与对照组的比较

IL—12、IL—18、IL—10的水平RA组高于对照组（P<0.05），且IL—12、IL—18、IL—10的水平含量随OPN值的增高而上升。见表1。

表1两组IL—12、IL—18、IL—10的水平比较（pg/ml）

组别IL—12IL—18IL—10RA组250550118对照组1025022

讨论

RA病理特征为关节滑膜出现慢性的炎症，主要表现为在关节滑液积聚了大量的炎症细胞及细胞因子，从而使得T淋巴细胞、巨噬细胞被激活，从而引起骨膜组织增生，形成新的血管。新增的骨膜组织具有能破坏酶细胞的介导，损害关节部位。国内外不少的资料显示，RA属于异质性疾病[3]。

RA作为自身免疫异常的疾病，其自身的抗原机理还不是十分明确。因此本研究通过ELISA酶联法对患者的关节液中的OPN及细胞因子水平进行分析，发现在RA患者中的OPN及细胞因子的水平明显高于非RA的患者。OPN在关节液中的水平含量达到15.2μg/ml，而IL—10、IL—12、IL—18含量也显著地提高。由于OPN受体十分复杂，家族里的结构相似的分子有多种，OPN分子中含有多个功能域，表现为RGD与整合素结合，通过这些功能结构，OPN可以与纵多的受体结合，当它与细胞表面分子结构结合时可以促进细胞迁移、黏附以及转导细胞信号。相关文献报道，在小鼠体内OPN对巨噬细胞表达具有抑制作用，其发生的机制主要是与受体CD44相关。在CD4基因被剔除的小鼠中发现IL—12的表达仍然受OPN的影响。CD44基因可阻断OPN对IL—10的抑制作用，在不含有CD44基因的小鼠中发现，IL—10的水平显著升高[4]。

影响OPN对细胞影响的因素有多种，本实验的结果只是初步证明OPN对受体的表达主要存在骨膜组织上，而CD44基因主要是骨膜组织中表达。但关于OPN与受体如何结合发挥作用，还需要进一步进行研究。

参考文献

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