血清HBV—DNA荧光定量PCR检测与乙肝病毒标志物模式的相关性
【摘要】目的分析讨论血清HBV-DNA荧光定量PCR检测与乙肝病毒标志物模式的相关性。方法对1196例患有乙肝的患者同时进行血清HBV-DNA荧光定量PCR检测与乙肝病毒标志物检测,对其结果进行统计分析。结果对于比较常见的模式1,3,5阳性503,HBV-DNA阳性率95.8;1,4,5阳性469例,HBV-DNA阳性率23.8;1,5阳性103例,HBV-DNA阳性率35.8;1,3阳性103例,HBV-DNA阳性率3.8。结论仅仅依靠乙肝病毒标志物的检测进行早期诊断以及判断病毒含量、病程发展情况是远远不够的,要结合HBV-DNA荧光定量PCR检测,这样才能对乙型肝炎基因诊断,特别是进行抗病毒治疗和治疗监测方面起到重要作用。
【关键词】血清HBV-DNA荧光定量PCR;乙肝病毒标志物;相关性
乙型肝炎是一种严重威胁人类健康的传染病,据世界卫生组织估计,每年有100万人死于本病,我国为乙肝高发区,约有1.2亿人为乙肝病毒携带者[1]。临床上乙肝病原学诊断传统上采用ELISA法来检测HBV,它检测的是人体对HBV的免疫反应状态,是目前诊断乙型肝炎最常用的指标;实时动态荧光定量PCR检测乙型肝炎病毒脱氧核糖核酸(DNA),能反映血液中病毒核酸的确切数量。现就血清HBV-DNA荧光定量PCR检测与乙肝病毒标志物模式的相关性做以下讨论分析:
1资料与方法
1.1一般资料2011年1月——2013年1月间的1196例乙肝的患者,男673例,女523例,年龄11-67岁,临床诊断符合2000年全国传染病学术会议诊断标准[2]。
1.2方法乙肝病毒标志物检测采用ELESA法,检测试剂盒为(上海科华有限公司)提供,完全按照试剂说明书操作;血清HBV-DNA荧光定量PCR检测使用BIO-RAD i-Cycler荧光定量PCR检测仪进行检测,试剂为(深圳匹基生物工程股份有限公司)提供,完全按照试剂说明书操作。对5项乙肝病毒标志物报告顺序为HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb。
2结果
对于比较常见的模式1,3,5阳性503,HBV-DNA阳性率95.8;1,4,5阳性469例,HBV-DNA阳性率23.8;1,5阳性103例,HBV-DNA阳性率35.8;1,3阳性103例,HBV-DNA阳性率3.8,见表1。
3讨论
乙型肝炎血清标志物检测是目前诊断乙型肝炎最常用的指标,现仍是检测乙型肝炎的常用方法,随着分子生物学的发展,荧光定量PCR技术广泛用于临床的诊断与治疗,它是直接检测血清中的乙型肝炎病毒DNA,是反应人体内乙型肝炎病毒复制的直接指标,也是最特异,最灵敏的指标,反映了乙型肝炎病毒数量不同在患者肝脏中的复制情况[3]。
从本组实验表明:乙型肝炎患者血清HBV标志物模式不同,其HBV-DNA阳性率也有所差异,对于比较常见的模式1,3,5阳性503,HBV-DNA阳性率95.8;与有关文献报道一致[4]。1,4,5阳性469例,HBV-DNA阳性率23.8;1,5阳性103例,HBV-DNA阳性率35.8;1,3阳性103例,HBV-DNA阳性率3.8。结果显示HBeAg阳性者HBV-DNA含量明显高于阴性者,而阴性者中仍有HBV-DNA阳性,说明即使HBeAg转阴HBV-DNA复制并不一定停止,提示HBV-DNA复制处于较低水平。
综上所述,乙肝病毒标志物它主要反映人体对乙型肝炎免疫反应状态,但不能直接反应HBV在患者体内的具体含量,但因其价格低廉,操作方便快捷,依然是实验室常用的检测手段,使用荧光定量PCR技术检测HBV DNA,与乙肝病毒血清标志物结合使用,可为临床提供更为有效、更有价值的信息,临床上要尽可能同时检测两者,为临床提供更可靠的诊断依据。
参考文献
[1]刘树林,邹菊贤.PCR检测HBV-DNA与HBV血清标志物常见模式和Pre-S2相互关系研究[J].重庆医学,2001,30(2):100-101.
[2]中华医学会传染病与寄生虫病学分会.病毒性肝炎防治方案[J].中华传染病杂志,2001,19(1):5662.
[3]李校坤,吴凡.实行定量PCR在乙型肝炎(HBV)诊断中的应用[J].中国生物工程杂志,2002,22(3):68.
[4]郭晏海,张菊,赵锦荣,等.聚合酶链反应荧光偏振技术与乙型肝炎病毒检测中的应用及价值.中华检验医学杂志,2004,27:26.
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