桂西地区脊柱结核患者血清IL27的检测及其临床意义

对照组，应用酶联免疫吸附法检测两组血清IL27的表达含量，同时采用常规方法检测C反应蛋白（CRP）和红细胞沉降率（ESR），比较两组间IL27、CRP及ESR表达含量的差异，分析观察组IL27水平与CRP、ESR水平之间的线性关系。结果两组受试者血清IL27、CRP及ESR表达含量差异有统计学意义（P<0.01），观察组IL27、CRP及ESR水平均显著高于对照组；观察组患者血清IL27与CRP、ESR水平均无线性相关（P>0.05）。结论脊柱结核患者血清IL27的表达水平升高，提示其可能参与脊柱结核的发生与发展。

【关键词】脊柱结核；白细胞介素27；C反应蛋白；红细胞沉降率

中图分类号：R529.2文献标识码：ADOI：10.3969/j.issn.10031383.2016.05.002

【Abstract】ObjectiveTo detect the expression level of serum Interleukin27 （IL27） in patients with spinal tuberculosis，so as to explore its clinical significance.Methods30 cases of spinal tuberculosis admitted to hospital from January to May，2016 were selected as observation group，and 32 healthy subjects who received physical examination in physical examination center during the same period were chosen as control group.The serum levels of IL27 in the control group and the observation group were measured by enzyme linked immunosorbent assay.And the C reactive protein （CRP） and erythrocyte sedimentation rate（ESR） were detected by routine method.The differences of IL27，CRP and ESR levels between the two groups were compared，and the linear correlation between IL27 and CRP，ESR levels in the observation group was analyzed.ResultsDifference of the IL27，CRP and ESR expression contents of the two groups was statistically significant（P<0.01），and those in the observation group were significantly higher than those in the control group.There was no significant linear correlation of the serum IL27 with CRP and ESR levels in the observation group （P>0.05）.ConclusionThe level of serum IL27 in patients with spinal tuberculosis increase，suggesting that it may involve in the occurrence and development of spinal tuberculosis.

【Key words】spinal tuberculosis；IL27；CRP；ESR

脊柱結核（spinal tuberculosis）是由结核分枝杆菌引起的，属于肺外结核的一种脊柱感染性疾病。其患病率约占骨关节结核的50%[1]。近年来，随着流动人口，AIDS患者及耐药结核分枝杆菌的增加，脊柱结核的发病率日益增多。由于脊柱结核极易并发瘘管、窦道及关节畸形等，甚至出现截瘫[2]，严重影响患者的生活质量及预期寿命，其已经成为我国公共卫生亟待解决的重要问题。目前，脊柱结核的确切发病机制尚未明确。白细胞介素27（interleukin27，IL27）是一种多效性细胞因子，具有促进和抑制炎症的双重作用，主要由巨噬细胞、树突状细胞及单核细胞等抗原提呈细胞产生。其基因位于人第16号染色体上（16p11），由两个亚基组成：EB病毒诱导基因3（EBI3）和p28[3]。相关资料显示[4，5]，IL27参与肺结核的发生与发展，在肺结核的免疫调节中发挥重要的作用。本研究应用酶联免疫吸附法（enzymelinked immunosorbent assay，ELISA）对30例桂西地区脊柱结核患者及32名健康者的血清IL27水平进行检测，同时结合C反应蛋白（CRP）和红细胞沉降率（ESR）进行相关性分析，以初步探索IL27在脊柱结核发病机制中的作用。

1资料与方法1.1收集资料选择2016年1～5月右江民族医学院附属医院收治住院的30例脊柱结核患者作为观察组，男性19例，女性11例，年龄36～67岁，平均（49.58±8.82）岁。同期随机选择在本院体检中心进行健康体检的32名健康者作为对照组，男性15名，女性17名，年龄28～70岁，平均（45.21±9.15）岁，入选者近期无结核病接触史或感染性疾病，影像学及临床指标检查均未提示异常。本研究获得右江民族医学院附属医院伦理委员会批准，所有受试者知情并签署知情同意书。

1.2病例纳入与排除标准

1.2.1纳入标准患者既往无肺结核或其他肺外结核，亦无其他感染性疾病，住院前未接受过抗结核药物治疗，术前CT、MRI及术后病理诊断均为脊柱结核。所有患者均为广西籍贯，且长期居住于桂西地区。

1.2.2排除标准患者患有肺结核或其他脏器的结核病、合并遗传性疾病（如地中海贫血）、合并其他感染性疾病（如乙肝、梅毒或AIDS）、合并影响机体免疫状态的疾病（如肿瘤）、患有自身免疫性疾病（如系统性红斑狼疮和类风湿性关节炎）。

1.3方法

1.3.1标本收集于清晨分别用抗凝管和促凝管抽取受试者肘正中静脉血2 ml和3 ml，其中，抗凝血用于检测ESR，促凝血分离血清后用于检测IL27和CRP水平。

1.3.2血清IL27水平的检测IL27酶联免疫试剂盒购买于武汉华美生物工程有限公司，严格按照试剂盒说明书进行操作。

1.3.3CRP及ESR水平检测根据英国RIQAS标准，由本院检验科同一专业人员分别使用日本7600全自动生化分析仪和意大利Test1全自动血沉分析仪对CRP及ESR进行检测。

1.4统计学方法采用SPSS 18.0软件进行分析，以均数±标准差（±s）表示计量资料，应用两独立样本t检验进行比较，线性关系采用Pearson相关分析法，检验水准：α=0.05。

2结果2.1血清IL27水平的标准曲线绘制不同浓度梯度标准品的OD值如表1和图1所示。

2.2对照组与观察组血清IL27、CRP、ESR的表达水平与对照组相比较，观察组IL27、CRP及ESR表达水平呈显著性高表达（P<0.001）。见表2。

2.3观察组患者血清IL27与CRP、ESR水平的相关性经Pearson线性相关性分析，观察组患者血清IL27与CRP、ESR含量均无线性相关（r=0.115，P>0.05；r=0.237，P>0.05）。

3讨论脊柱结核是一种常见的肺外结核，早期临床表现为背部疼痛，随之出现消瘦、低热及夜间盗汗等症状[6]，后期会使椎体不断被破坏并塌陷，导致患者发生脊柱畸形，严重者甚至会出现脊髓受压迫，发生神经系统功能障碍而致瘫痪[7，8]。如果不能及时治疗，脊柱结核将严重威胁患者的生命安全。目前，脊柱结核的早期诊断十分困难，尚未发现有效且安全的預防措施。虽然外科手术联合抗结核药物仍是治疗脊柱结核的主流，但外科手术治疗给患者带来极大的创伤，亟待临床骨科医生解决。

研究表明[9]，IL27参与抗结核免疫的炎症介导过程，尤其是以Th1细胞免疫为主导的病理过程。在结核病的炎症性反应中，IL27具有促进炎症和抑制炎症的双重作用。其不仅能够激活Th1细胞，促进单核细胞、巨噬细胞及NK细胞等活化，从而增加IL18、IL1及INF等炎症因子的产生，进而促进炎症反应[10]。而且，IL27还可以通过抑制完全活化的CD4+细胞，进而抑制多种炎症因子的释放，从而发挥抑制炎症的作用。国内学者鄢仁晴等[11]在研究肺结核患者外周血IL27的表达情况中发现，与健康对照组相比较，肺结核患者的IL27呈显著性增高，提示其可能参加机体抗结核的免疫应答，从而认为检测肺结核患者外周血IL27的水平有望用于判断肺结核的炎症程度。此外，国外学者Lim等[12]在研究IL27与肺结核的相关性研究中发现，IL27在肺结核患者中呈现出高表达状态，提示其参与了肺结核的发生与发展。

目前，国内外关于血清IL27与肺结核的研究较为多见，而与脊柱结核的相关研究报道鲜见。为此，本研究应用ELISA技术对30例桂西地区脊柱结核患者及32名健康者的血清IL27表达含量进行检测，目的在于初步研究IL27在脊柱结核发病机制中的作用。结果显示，桂西地区脊柱结核患者的IL27表达水平较健康者显著性增高。这与鄢仁晴及Lim等的研究结果相一致，提示脊柱结核的发生可能与IL27介导的以Th1细胞为主的免疫刺激存在密切联系。因此，检测血清IL27水平有望成为脊柱结核早期诊断和病情监测的有效炎症性标记物。

同时，本研究对两组受试者的CRP及ESR表达水平进行检测。结果表明，与对照组相比较，脊柱结核患者CRP及ESR水平较均呈显著性高表达状态，提示脊柱结核患者的炎性反应呈活动性。此外，本研究未发现观察组血清IL27水平与CRP水平或ESR水平存在线性相关，考虑脊柱结核患者机体IL27水平与CRP、ESR水平之间存在独立的调控机制。由于CRP及ESR的高表达水平受多种因素的影响，缺乏相关特异性指标，因此IL27表达与CRP及ESR水平无线性相关并未能否定IL27在脊柱结核发病机制中的关键作用。

综上所述，脊柱结核患者血清IL27的表达水平升高，提示其可能参与脊柱结核的发生与发展，但具体机制尚未明确，有待进一步研究。相信随着对脊柱结核发病机制及IL27的深入探索，检测IL27水平有望为脊柱结核的预防、诊断、治疗及判断预后提供新思路。

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[12]Lim J，Derrick SC，Kolibab K，et al. Early pulmonary cytokine and chemokine responses in mice immunized with three different vaccines against Mycobacterium tuberculosis determined by PCR array[J].Clin Vaccine Immunol，2009，16（1）：122126.

（收稿日期：2016-08-18修回日期：2016-09-30）

（编辑：潘明志）